PG电子推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理的检测试剂盒，旨在为科研人员提供高效、精准的检测方案。本产品具备以下显著特点：

产品特点

1. 便捷易用：用户只需提供样品DNA模板，即可立刻开启实验。
2. 高灵敏度：经过优化的引物等组分，确保了产品的高灵敏度。
3. 阳性对照：提供阳性对照，便于有效区分假阴性样品。
4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高保守区，避免与其他生物样本的DNA发生交叉反应。
5. 多用途检测：可用于定性和定量检测，定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6. 足够使用：产品支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 科研专用：本产品仅供科研用途。

操作步骤

一、DNA提取

采用自选方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市场上大部分核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

由于阳性对照浓度较高，建议在独立区域进行以下稀释操作，以避免污染样品或本试剂盒的其他成分：
1. 标记6个离心管，分别为7、6、5、4、3、2。
2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL阳性对照，经过充分震荡1分钟得到标准曲线样品。
4. 按照相同步骤，将前一步稀释所得的样品继续稀释，直至得到6个稀释度的标准曲线样品。
5. 若无须制作标准曲线，可将阳性对照直接稀释至1×10E5拷贝/μL。

三、试剂配制

根据待检样品数量，准备相应数量的qPCR管，向各PCR管中添加必要的组分，具体说明请参考详细说明书。

四、添加模板

向qPCR管中添加2μL模板，依次为阴性对照、待测样品、阳性对照，离心30秒后立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置于扩增仪器相应位置进行扩增，具体程序参考详细说明书。

六、结果分析

1. 如果制作标准曲线，应以阳性对照浓度的log值作为横轴，Ct值作为纵轴绘制曲线，并从中推算样品DNA浓度的log值。
2. 若未制作标准曲线，依据以下标准判断结果：阳性对照的Ct值应<30，呈现明显的指数增长，独特的S型曲线；阴性对照的Ct值应≥38或无Ct值，未见明显增长；样本Ct值<35则表明样本中检测到目标DNA，结果为阳性；若Ct值在35-38之间，需复检。

运输与保存

本试剂盒需低温运输，储存在-20℃的环境中，保存期限为一年。阳性对照需单独存放，以避免污染其他试剂。

总之，选择PG电子的检测试剂盒，您将获得优质的实验体验和可靠的检测结果。我们的产品将是您科研工作中的得力助手。