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NEWSPG电子 ELISA实验样本处理与保存指南
来源:谢静蕊 日期:2025-07-17ELISA,即酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),是一种广泛应用于生物医学领域的免疫检测方法,旨在检测和定量特定蛋白质或其他生物分子。该方法的核心原理是基于抗原与抗体之间的特异性结合,利用酶的催化作用扩增信号,以实现对目标分子的高灵敏度检测。
进行ELISA检测的首要目的是为实验提供准确的依据。为了确保数据的可靠性,必须实施全面的质量控制,并制定详尽的标本采集计划。
1. 每个样本的采集体积应为100µl乘以检测种类。如果需要复孔,样本体积应为100µl乘以检测种类再乘以2。
2. 标本在冷藏条件(2-8°C)下可保存一周,如果无法及时检测,应分装并冷冻于-20°C或-80°C,避免反复冻融。
3. 检测范围可能与样本中待测物的浓度范围不完全对应,建议实验前参考相关文献来预估浓度,并通过预实验确认。
4. 在采集血清标本时,应避免溶血,因为红细胞溶解会释放具有过氧化物酶活性的物质,从而干扰检测。
5. 为确保尿液检测的准确性,需使用干净的无菌容器收集尿液,建议使用一次性容器,以减少污染的风险。同时,尿液样本须新鲜并及时检测。
6. 标本应尽量在新鲜状态下进行检测,细菌污染可能导致假阳性反应。
7. 为减少样本的蛋白质劣化,需避免反复冻融。如果样本需要多次检测,建议少量分装以冻存。
ELISA常见的标本包括:
1. 血清:在室温下让血液凝固10-20分钟后,进行离心(2000-3000转/分,约20分钟),仔细收集上清。若出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:根据标本需求选择适当的抗凝剂(如EDTA或柠檬酸钠),混合10-20分钟后同样进行离心和收集。
3. 尿液:收集后须离心并仔细处理,以确保上清的纯净。
4. 细胞培养:收集分泌物时,需用无菌管离心并收集上清;若检测细胞内成分,则需使用PBS稀释。
5. 组织标本:切割标本后,加入PBS并迅速冷冻,以保留其生物活性。
ELISA是一种强大且灵敏的检测技术,适用于各种生物医学研究。通过严格控制样本的处理和保存条件,可以显著提高实验的可靠性和结果的准确性。选择PG电子的ELISA试剂盒将为您的实验提供最佳的支持。
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